脑力智宝对乳鼠脑神经细胞有营养作用

《中国临床康复》2004年第8卷第34期报道了首都医科大学北京神经科学研究所包金风、广州中医药大学中医基础教研室张晓文等对中药脑力智宝对乳鼠脑皮质神经细胞和PC12细胞生长发育的影响的研究报告。

脑力智宝是由益智仁、龟甲、枸杞子、石菖蒲、核桃仁、当归、远志、红花等组成的中药复方，临床和实验研究证实其具有增强神经生长因子（NGF）受体表达、促进儿童智力发育、改善大脑微循环和脑能量代谢、提高脑内RNA含量，促进脑内蛋白质的合成及促进多巴胺能神经功能等作用。

方法：将SD大鼠分为脑力智宝提取物高剂量组（0.63g/L）、低剂量组（0.04g/L）和对照组，连续给药7次后眼球取血制备含药血清，用MTT法检测脑力智宝对原代培养神经细胞生长发育的影响；用分散培养法培养PC12细胞，测定加入不同浓度脑力智宝提取物(0.63和0.04g/L)、脑力智宝含药血清（6和3g/kg）、神经生长因子后PC12细胞在24、48和72小时的突起阳性细胞百分比。

结果证实： 脑力智宝对PC12细胞具有营养作用，使细胞突起增加增长，阳性细胞数增多，48小时时0.63g/L脑力智宝提取物可使阳性细胞百分数从模型组的17.2％提高到38.4％（t=4.89，P<0.01），3g/kg脑力智宝含药血清可使阳性细胞百分数达到69.0％（t=9.37，P<0.01），并可促进原代培养鼠脑皮质神经细胞的生长发育，MTT法检测A值明显增加，尤以0.63g/L脑力智宝提取物组和3g/kg脑力智宝组作用明显。0.63g/L脑力智宝提取物可显著促进PC12细胞增殖，细胞数目较对照组分别增加，差异均有显著性意义（t=2.67，5.27，3.12；P<0.05～0.01），均与对照组比较有显著性差异；6g/kg含药血清组亦显著增加。脑力智宝提取物和含药血清均可促进无血清培养神经细胞轴突生长，对原代培养的神经细胞均具有促进生长作用，使突起阳性细胞数增加。

研究人员指出，在神经元发育和再生过程中，神经轴突的延长和引导是其主要特征，神经元的突起是研究脑发育和退化的重要指标，NGF对神经元的营养支持起重要作用，若缺乏NGF的营养支持，将引起神经元的早衰和老年性痴呆的发生。PC12细胞是研究神经元轴突生长发育的理想细胞模型，其具有NGF的核受体，NGF可诱导PC12细胞的分化从不断增殖生长状态细胞转变成具有轴突等交感神经元特征的终末分化细胞。目前研究细胞营养作用有关的体外实验皆采用无血清培养细胞的方法，以消除血清中一些其他营养因素的影响，但由于原代培养的神经元体外不易存活，故本实验采用血清培养然后转为无血清培养的方法。

本研究表明，脑力智宝在一定范围内能促进PC12细胞的增殖，呈较好的量效关系，形态学观察脑力智宝对PC12细胞具有营养作用，使细胞突起增加增长，阳性细胞数增多，48小时时0.63g/L脑力智宝提取物可使阳性细胞百分数从模型组的17.2％提高到38.4％，3g/kg，脑力智宝含药血清可使阳性细胞百分数达到69.0％，并能够促进原代培养的鼠脑皮质神经细胞的生长发育的作用，MTT法检测A值明显增加，尤以0.63g/L脑力智宝提取物和3g/kg脑力智宝含药血清组作用明显。表明脑力智宝确含有对神经细胞营养作用的有效成分。推测可能脑力智宝除具有NGF受体激动作用外，其所含有的一些成分本身就具有促进神经细胞生长发育的作用。另外，该药中益智仁含有的益智醇具有钙调节作用，而钙在NGF合成过程中起着第二信使的作用。有文献报道当归对坐骨神经损伤后的再生具有促进作用，推测可能脑力智宝除具有NGF受体激动作用外，其所含成分可能具有促进神经细胞生长发育的作用，其作用机制尚待进一步探讨。