右旋紫草素和紫草素促进大鼠肉芽组织增生的组织学研究

曾报道，紫草的醚提物能加速棉球诱导的肉芽组织增生。本次对右旋紫草素和紫草素促进大鼠肉芽组织增生的作用进行了组织学研究。

材料和方法：

①棉球诱导肉芽组织增生实验：右旋紫草素和紫草素分别溶于1%吐温80。雄性Wistar大鼠体重约为250g，随机分组。在乙醚麻醉下，背部皮肤消毒后做一切口，皮下植入一重约20.0±1.0mg的消毒棉球（其中右旋紫草素组及紫草素组棉球内分别含0.1ml及0.3ml不同药液，对照组仅植入一个内含0.1ml吐温的棉球）。分别于术后5d及10d取出棉球及肉芽组织，在60℃培养箱干燥24h，棉球重量比植入前增加的部分即肉芽组织干重。

②流式细胞仪分析淋巴细胞抗原表达：带肉芽组织的棉球，在PBS中剪碎并通过300目筛去棉球碎片，离心并用氯化铵溶血，冲洗后与不同的荧光标记抗体（结合R－PE的抗CD3抗体及结合FITC的抗CD11b抗体）室温孵育30min。在流式细胞计数仪上分析CD3⁺和CD11b⁺细胞占白细胞总数的百分比。

③组织学观察：分别于术后5d及10d取出长有肉芽组织的棉球及其覆盖的皮肤，固定，脱水，石蜡包埋，做到4μm厚的病理切片，再经脱腊，0.3%过氧化氢甲醇封闭，分别与抗TGF-β抗体及抗α－平滑肌肌动蛋白抗体孵育，用SABC法进行免疫组化染色。

结果和讨论：

①右旋紫草素和紫草素有促进大鼠肉芽组织增生的作用。术后10d右旋紫草素和紫草素组的肉芽组织干重较对照组显著增加，但两种药物之间无显著性差异，术后5d各组肉芽组织干重无差异。

②两种药物都没有增加肉芽组织中CD3⁺细胞数量，但术后10d两个药物组肉芽组织中CD11b⁺细胞数量较对照组明显增加。

③右旋紫草素组和紫草素组术后5d皮下组织厚度都有增加，其中表达TGF－β的巨噬细胞和浸润细胞增加，10d后浸润细胞减少，成纤维细胞增加，可观察到棉球周围肉芽组织有胶原合成及再上皮化。另外术后5d细胞外α－平滑肌肌动蛋白增加，肉芽组织周围可见新生血管。研究表明，右旋紫草素和紫草素可促进炎性细胞浸润，新生毛细血管增加，成纤维细胞及胶原含量增加，从而促进大鼠肉芽组织增生。